Introduzione agli strumenti e alle funzioni di colture cellulari per lo scambio di tecnologie sperimentali cellulari
La composizione delle cellule è generalmente suddivisa in quattro aree: area di preparazione, area di preparazione, area di stoccaggio e area sterile.
Le funzioni principali dell'area di preparazione sono la pulizia, la disinfezione e la preparazione; L'area di preparazione è utilizzata principalmente per la preparazione di terreni di coltura e reagenti; L'area di deposito è adibita a banca cellulare e deposito merci; L'area sterile è il luogo in cui il personale di laboratorio si cambia, tampona e coltiva. Il processo di coltura cellulare può essere suddiviso in quattro parti in base alle loro funzioni: coltura cellulare, conservazione, preparazione e sterilizzazione.
1、 Strumento per colture cellulari e introduzione
[1. Banco da lavoro super pulito]
Il banco ultra pulito a flusso verticale è generalmente utilizzato per la coltura cellulare. Sotto pressione positiva, non vi è alcuna perdita di gas. Solo l'oggetto operativo è protetto, ma il personale e l'ambiente di laboratorio non sono protetti.
L'irradiazione ultravioletta realizza la funzione di sterilizzazione. Sterilizzazione a raggi ultravioletti (superficie) + sterilizzazione con ozono (angolo morto, deflettore chiuso). Ogni irradiazione ultravioletta dura 20-30 minuti e l'aria viene soffiata per 10 minuti prima dell'uso (prestare attenzione al cambio d'aria nella stanza della coltura). La pulizia raggiunge la classe 100.
Dopo 3000 ore, la potenza della lampada ultravioletta sarà ridotta al 70% dell'originale. Sostituire per tempo il panno filtrante grosso sulla parte superiore e rimuoverlo regolarmente per la pulizia.
[2. Armadio di biosicurezza]
Sotto pressione negativa, il gas non fuoriesce, il che non solo protegge il campione, ma si concentra anche sulla protezione dell'operatore e dell'ambiente. Le cellule di sicurezza secondarie trasportano virus (come hele / KB), campioni umani clinici in coltura primaria (funghi), esperimenti relativi al lentivirus.
[3. Bombola di CO2]
Le bombole di CO2 sono utilizzate principalmente per lo stoccaggio di gas CO2. Nel processo di coltura cellulare, la maggior parte delle cellule deve essere eseguita a condizione che il contenuto di CO2 sia del 5%. La bombola di CO2 è collegata principalmente all'incubatrice per il mantenimento stabile del contenuto di CO2.
[4. microscopio invertito]
Il microscopio invertito è un'attrezzatura necessaria di routine nel lavoro quotidiano del laboratorio di coltura cellulare. Viene utilizzato principalmente per comprendere la crescita delle cellule e osservare il verificarsi di infezioni. Se i fondi lo consentono, si consiglia di scegliere un microscopio a contrasto di fase, un microscopio anatomico, un microscopio a fluorescenza, un sistema di registrazione video o un dispositivo per la ripresa di filmati time-lapse dotato di un sistema di telecamere, in grado di riprendere e registrare la crescita cellulare in qualsiasi volta.
[5. Centrifuga da tavolo]
La centrifuga è uno strumento speciale che utilizza la forza centrifuga per separare e far precipitare il liquido misto (contenente solidi). Viene utilizzato principalmente per preparare la sospensione cellulare, regolare la densità cellulare, lavare e raccogliere le cellule. La velocità di centrifugazione nella coltura cellulare è generalmente di 300 xg (circa 1000 giri/min) per 5-10 minuti. Una velocità di rotazione troppo alta causerà la morte cellulare. In base alle diverse esigenze, ci sono centrifughe più funzionali tra cui scegliere, come centrifughe di grande capacità, a temperatura regolabile, centrifughe ad alta velocità e centrifughe di congelamento a bassa temperatura.
[6. incubatrice a CO2]
La CO2 è un prodotto metabolico delle cellule, un componente essenziale della crescita cellulare ed è anche correlato al mantenimento del pH del mezzo di coltura. Nella coltura cellulare, O2 e CO2 sono condizioni necessarie per la crescita cellulare. Gli incubatori a CO2 hanno tipi asciutti e umidi e le condizioni di coltura sono generalmente impostate a 37 ℃ e 5% di CO2. L'acqua nella vaschetta dell'acqua dell'incubatrice a CO2 non viene contaminata da acqua sterile + sostituzione regolare per 2 settimane + conservante (0,02% di sodio azide o 2% di solfato di rame).
[7. Piastra conta celle (dispositivo)]
Il contatore di cellule è uno strumento di conteggio controllato da un microcomputer che integra conteggio, statistiche e visualizzazione. È affidabile e comodo da usare.
[8. Pipetta]
La funzione principale della pipetta è aspirare e rimuovere liquidi come mezzo di coltura durante la coltura cellulare. L'intervallo di misurazione principale utilizzato nella coltura cellulare è costituito da 10ul / 100ul / 200ul / 1000ul.