Il terreno di coltura è classificato in base all'uso
In base ai diversi usi, il mezzo di coltura può essere suddiviso in mezzo di coltura di base, mezzo di coltura nutriente, mezzo di coltura di arricchimento, mezzo di coltura selettivo, mezzo di coltura di identificazione, mezzo di coltura anaerobico, ecc.
1. Il mezzo di base è la base nutrizionale comunemente richiesta dalla maggior parte dei microrganismi. Se un microrganismo ha esigenze speciali, può aggiungere alcuni ingredienti su questa base, come acqua peptonata, brodo di coltura, agar nutriente, ecc. Il mezzo di acqua peptonata all'1% è il mezzo di base più semplice. Questo terreno di base può essere utilizzato per la coltura di arricchimento batterico generale e il test del substrato indaco. Se vengono aggiunti indicatori e zuccheri, verrà preparato nel mezzo di fermentazione dello zucchero per il test di fermentazione dello zucchero e diventerà un mezzo di identificazione; Se il dosaggio di cloruro di sodio viene aumentato nell'acqua peptonata all'1% e il pH viene portato a circa 8,6, diventerà acqua peptonata alcalina per la coltura di arricchimento di Vibrio cholerae e diventerà uno speciale mezzo di arricchimento.
2. I mezzi nutritivi aggiungono alcuni nutrienti speciali, come glucosio, sangue, siero, estratto di lievito, fattori di crescita, ecc. al mezzo di coltura di base, in modo che possano crescere batteri con elevate esigenze nutrizionali. Lo Streptococcus pneumoniae, ecc. deve crescere in un mezzo contenente sangue o siero; Uova, patate, glicerina, ecc. devono essere aggiunti al terreno di coltura di Mycobacterium tuberculosis. Il mezzo nutritivo più comunemente usato è la piastra di agar sangue.
3. Il mezzo di arricchimento è generalmente un mezzo liquido, utilizzato per la coltura di arricchimento dei batteri. Può essere usato ampiamente o specialmente. Gli speciali mezzi di arricchimento spesso contengono nutrienti speciali o fattori di crescita richiesti dalla crescita dei batteri bersaglio.
4. Mezzi selettivi: i mezzi selettivi contengono sostanze nutritive (battericidi) e agenti batteriostatici (selettori). Dopo che il campione è stato inoculato in tali mezzi, i batteri non bersaglio vengono inibiti in varia misura a causa dell'inibizione selettiva degli agenti batteriostatici, che è più favorevole alla proliferazione o alla separazione dei batteri bersaglio. Il tasso di rilevamento positivo dei batteri bersaglio può essere migliorato utilizzando il mezzo selettivo per un certo periodo di tempo e quindi inoculandolo nel mezzo di identificazione selettivo. Esistono molti tipi di agenti batteriostatici, come verde malachite, verde brillante, selenite di sodio, desossicolato di sodio, sale biliare, solfonato di tetrasolfuro di sodio e vari antibiotici. La quantità aggiunta di agenti batteriostatici dovrebbe essere appropriata e precisa. Alcuni sono altamente tossici e altri non sono resistenti alla febbre alta. Particolare attenzione dovrebbe essere prestata alla preparazione.
5. Il mezzo differenziale è un substrato di reazione e un indicatore aggiunto al mezzo di coltura per distinguere le caratteristiche di alcuni microrganismi e identificarli. Può essere suddiviso in mezzo di identificazione generale e mezzo di identificazione selettivo. Il mezzo utilizzato solo per distinguere le diverse specie microbiche è chiamato mezzo di identificazione generale. Generalmente, questo tipo di terreno non aggiunge agenti batteriostatici ma contiene solo indicatori, come il mezzo ferro bisaccaride di Kirschner, che contiene glucosio e lattosio. Il rosso fenolo viene utilizzato come indicatore per osservare il cambiamento di colore del substrato di coltura e la superficie inclinata per determinare la capacità di fermentazione dei batteri a glucosio e lattosio. Aggiungere citrato di ammonio ferrico, Dopo la coltivazione, osservare se c'è una deposizione nera per determinare se i batteri decompongono gli amminoacidi contenenti zolfo nel peptone per produrre acido solfidrico; Un altro esempio è l'agar blu di metilene eosina, che contiene lattosio (substrato di reazione) ed eosina blu di metilene (indicatore) per identificare l'Escherichia coli, i batteri patogeni intestinali e altri batteri vari. Il mezzo di identificazione generale è caratterizzato dalla presenza di indicatori nella formula e può essere utilizzato per distinguere diversi tipi di microrganismi. Alcuni mezzi di identificazione possono anche essere utilizzati come bisogni speciali dei batteri per isolare e coltivare determinati batteri, come l'agar di soia triptone e l'agar sangue color cioccolato. che contiene lattosio (substrato di reazione) ed eosina blu di metilene (indicatore) per identificare Escherichia coli, batteri patogeni intestinali e altri batteri vari. Il mezzo di identificazione generale è caratterizzato dalla presenza di indicatori nella formula e può essere utilizzato per distinguere diversi tipi di microrganismi. Alcuni mezzi di identificazione possono anche essere utilizzati come bisogni speciali dei batteri per isolare e coltivare determinati batteri, come l'agar di soia triptone e l'agar sangue color cioccolato. che contiene lattosio (substrato di reazione) ed eosina blu di metilene (indicatore) per identificare Escherichia coli, batteri patogeni intestinali e altri batteri vari. Il mezzo di identificazione generale è caratterizzato dalla presenza di indicatori nella formula e può essere utilizzato per distinguere diversi tipi di microrganismi. Alcuni mezzi di identificazione possono anche essere utilizzati come bisogni speciali dei batteri per isolare e coltivare determinati batteri, come l'agar di soia triptone e l'agar sangue color cioccolato.
Alcuni inibitori e indicatori vengono aggiunti al mezzo di coltura per inibire la crescita di alcuni batteri, promuovere la propagazione dei batteri bersaglio e fare in modo che le colonie batteriche in crescita abbiano determinate caratteristiche per facilitare l'identificazione e la selezione. Questo tipo di terreno di coltura è chiamato terreno di identificazione selettivo. Ad esempio, SS Agar contiene lattosio (substrato di reazione), rosso neutro, citrato di ammonio ferrico (indicatore), verde brillante e sale biliare (agente batteriostatico) nella formula del terreno. Agenti batteriostatici come il verde brillante e il sale biliare possono inibire la crescita dei batteri Gram-positivi e di alcuni Escherichia coli, ma non hanno alcun effetto su Salmonella e Shigella. Inoltre, l'Escherichia coli può fermentare il lattosio per produrre acido, rendendo le colonie rosse. Salmonella e Shigella non fermentano il lattosio, e le loro colonie sono incolori. Se i batteri producono idrogeno solforato, reagirà con il citrato di ammonio ferrico per formare precipitazioni di solfuro ferroso e il centro della colonia sarà nero o marrone. In modo da raggiungere lo scopo dell'identificazione.
Negli ultimi anni, in patria e all'estero è stato sviluppato un mezzo di sviluppo del colore speciale per alcuni batteri utilizzando gli enzimi specifici di alcuni batteri e selezionando i substrati corrispondenti. È stato utilizzato per l'isolamento e l'identificazione dei batteri e ha ricevuto buoni risultati. Questo mezzo di sviluppo del colore è in realtà anche il mezzo di identificazione. Il principio di base è aggiungere la combinazione di cromogeno (o fluorogeno) e substrato di azione batterica nel mezzo di coltura e, quando i batteri contengono enzimi corrispondenti, la combinazione verrà decomposta per sviluppare colore (o visualizzare fluorescenza). Ad esempio, il coniugato del glicoside cromogeno viene decomposto sotto l'azione della glicosidasi per separare il glicoside dal cromogeno e visualizzare il colore; I coniugati di amminoacidi fluorescenti (senza fluorescenza) mostrano fluorescenza separando gli amminoacidi dalle sostanze fluorescenti sotto l'azione dell'amminopeptidasi. I cromogeni comuni per lo sviluppo del colore sono: α-naftolo β-naftolo, o-nitrofenolo, p-nitrofenolo, p-nitroanilina, fenolftaleina, 2-ammino, 4-nitrobenzene, ecc.; I fluorofori comunemente usati includono 4-metilumbelliferone (noto anche come 7-idrossi-4-metilcumarina) e così via. Attualmente, il mezzo di sviluppo del colore è stato utilizzato per l'isolamento, l'identificazione e la coltura di una varietà di batteri o funghi, come Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e altri mezzi di sviluppo del colore. α-naftolo β-naftolo, o-nitrofenolo, p-nitrofenolo, p-nitroanilina, fenolftaleina, 2-ammino, 4-nitrobenzene, ecc.; I fluorofori comunemente usati includono 4-metilumbelliferone (noto anche come 7-idrossi-4-metilcumarina) e così via. Attualmente, il mezzo di sviluppo del colore è stato utilizzato per l'isolamento, l'identificazione e la coltura di una varietà di batteri o funghi, come Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e altri mezzi di sviluppo del colore. α-naftolo β-naftolo, o-nitrofenolo, p-nitrofenolo, p-nitroanilina, fenolftaleina, 2-ammino, 4-nitrobenzene, ecc.; I fluorofori comunemente usati includono 4-metilumbelliferone (noto anche come 7-idrossi-4-metilcumarina) e così via. Attualmente, il mezzo di sviluppo del colore è stato utilizzato per l'isolamento, l'identificazione e la coltura di una varietà di batteri o funghi, come Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans e altri mezzi di sviluppo del colore.
Esistono anche alcuni mezzi di identificazione che utilizzano vari sistemi enzimatici esclusivi dei batteri per decomporre e utilizzare vari zuccheri, alcoli, amminoacidi o altri substrati specifici per produrre acidi, gas, alcali o altre sostanze visibili, in modo da identificare batteri, come comunemente mezzi biochimici utilizzati.
Il mezzo di coltura utilizzato per il test delle caratteristiche biochimiche dei batteri è caratterizzato dall'aggiunta di un substrato specifico al mezzo di coltura basico senza zucchero e dall'aggiunta di un indicatore. Una serie di risultati di reazioni biochimiche di batteri in tale mezzo di coltura vengono infine visualizzati attraverso l'indicatore. Questo tipo di mezzo è un mezzo di identificazione della reazione biochimica. Secondo il dosaggio, può essere suddiviso in mezzo biochimico maggiore e mezzo biochimico minore. Vale la pena notare che alcuni componenti del mezzo di test biochimico sono influenzati da molti fattori, come l'alta temperatura e il pH. durante la preparazione e l'utilizzo, dovrebbe essere rigorosamente controllato in base alla situazione reale per evitare che i componenti efficaci vengano danneggiati, in modo da garantirne l'effetto d'uso.
6. Il terreno anaerobico è un terreno per l'isolamento, la coltura e l'identificazione di batteri anaerobici, chiamato terreno anaerobico. A causa della mancanza di vari enzimi necessari per il metabolismo aerobico, come citocromo e citocromo ossidasi, catalasi e perossidasi e superossido dismutasi, gli anaerobi non sono in grado di svolgere il metabolismo aerobico a causa dei propri difetti metabolici e l'energia generata dalla fermentazione anaerobica è insufficiente. Pertanto, gli anaerobi non possono crescere e sopravvivere nel normale ambiente atmosferico. Per consentire ai batteri anaerobici di crescere normalmente, è necessario preparare un terreno speciale con nutrienti ricchi, basso potenziale redox e fattori di crescita speciali.
Il terreno di coltura anaerobico viene solitamente preparato da estratti di cuore, cervello o altri organi ed è spesso necessario aggiungere tioglicolato di sodio, cisteina, residui di carne, ferro ridotto, carbone attivo e altri agenti riducenti o materiali disossidanti. Per osservare il contenuto di ossigeno del mezzo di coltura, è possibile aggiungere al mezzo di coltura liquido anche azurol o blu di metilene come indicatore redox. Cuore, estratto di cervello, massa epatica e residui di carne contengono acidi grassi insaturi, che possono assorbire l'ossigeno nel mezzo di coltura. Il tioglicolato di sodio e la cisteina sono forti agenti riducenti, che possono consumare ossigeno disciolto nel mezzo di coltura. Il carbone attivo secco e il cotone assorbente possono anche assorbire l'ossigeno nel mezzo di coltura. Perciò, lo scopo dell'aggiunta di agente riducente e materiale assorbente al mezzo di coltura è creare un ambiente anossico del mezzo di coltura e mantenere un basso potenziale redox. Inoltre, sulla superficie del mezzo di coltura può essere aggiunto uno strato di paraffina liquida per isolare il contatto tra il mezzo di coltura e l'atmosfera.
7. Liquido di cellule di coltura (LCL) si riferisce al liquido utilizzato per la coltura, la conservazione e il trasporto di tessuti, organi e cellule viventi in vitro per vari scopi. In sostanza, è un ambiente nutritivo che simula artificialmente la crescita in vivo, in modo che le cellule possano crescere e riprodursi in questo ambiente. Poiché il numero dei suoi componenti è chiaro e può osservare vari cambiamenti biologici dell'oggetto studiato regolando un determinato componente, è ampiamente utilizzato nella ricerca della biologia cellulare. I componenti della soluzione di coltura cellulare comprendono principalmente acqua, amminoacidi, vitamine, carboidrati, ioni inorganici, fattori di crescita, ecc. questi componenti devono essere rigorosamente selezionati e testati prima di poter essere utilizzati. L'acqua utilizzata deve soddisfare i requisiti dell'acqua di prova di grado 2 (CB / T 6682-1992).