La coltura cellulare animale e il suo sviluppo tecnologico nella produzione di vaccini virali
Il vaccino è un agente immunitario automatico per la prevenzione delle malattie infettive, che è costituito da microrganismi patogeni (come batteri, virus, ecc.) e dai loro metaboliti attraverso la riduzione artificiale del virus, l'inattivazione o l'ingegneria genetica. A seconda dei diversi tipi di agenti patogeni di malattie infettive che previene, può essere approssimativamente suddiviso in vaccini batterici e vaccini virali. Molti vaccini virali utilizzati nella popolazione ora devono essere preparati attraverso il processo di coltura, purificazione, concentrazione, inattivazione o lisi del virus. Poiché i virosomi sono una specie di microrganismi parassiti specializzati nelle cellule ospiti, la loro riproduzione deve essere effettuata nelle loro cellule ospiti specifiche. Perciò,
1 processo generale di coltura cellulare animale
La coltura cellulare animale si riferisce alla coltivazione di popolazioni di cellule animali vive in vitro. Attualmente, molti settori della biotecnologia utilizzeranno questa tecnologia. Soprattutto nel campo della medicina, la coltura cellulare ha un ruolo e un valore speciali. Ad esempio, molti vaccini o farmaci geneticamente modificati vengono ottenuti attraverso la coltura cellulare nel processo di ricerca e produzione. Gli strumenti e le apparecchiature comunemente usati per la coltura cellulare animale includono stanza asettica, banco da lavoro ultra pulito, frigorifero a bassa temperatura, pHmetro, sterilizzatore a vapore a pressione, incubatrice elettrotermica a temperatura costante, apparato di coltura, incubatrice a CO2, vaso per bagnomaria a temperatura costante, microscopio capovolto, centrifuga , filtro sterile, dispositivo di lavaggio, scheda di conteggio delle cellule e strumento di tecnologia cellulare elettronica, ecc, L'attrezzatura per l'automazione della coltura cellulare cfam di Shenyang GREAT ELITES Intelligent Equipment Co., Ltd. può realizzare il raddoppio della coltura delle cellule e la pulizia può raggiungere la classe GMP un livello di pulizia. È adatto per le imprese che necessitano di un gran numero di cellule in coltura. La coltura cellulare può essere suddivisa in coltura cellulare primaria e coltura cellulare in subcoltura.
1.1 coltura cellulare primaria
La coltura cellulare primaria è un processo in cui vari tessuti del corpo animale vengono estratti dal corpo, trattati con vari enzimi (tripsina comunemente usata), agenti chelanti (EDTA comunemente usato) o metodi meccanici, dispersi in singole cellule e coltivati in un mezzo adatto, in modo che le cellule possano sopravvivere, crescere e riprodursi.
Tuttavia, ci sono anche alcuni difetti nella coltura cellulare primaria, come potenziali fattori esogeni, mancata verifica della standardizzazione in anticipo e grandi differenze tra i lotti a causa dell'influenza dell'età del donatore e dello stato di salute. Pertanto, l'uso di cellule di passaggio stabili per coltivare questi virus anziché cellule primarie è diventata la direzione dello sviluppo futuro.
1.2 coltura cellulare in sottocoltura
In subcoltura, quando la coltura primaria ha successo, con l'allungamento del tempo di coltura e la continua divisione delle cellule, si verifica l'inibizione del contatto a causa del contatto tra le cellule e il tasso di crescita rallenta o addirittura si ferma; D'altra parte, sarà anche dannoso per la crescita o l'avvelenamento a causa di nutrienti insufficienti e accumulo di metaboliti. A questo punto, è necessario dividere la coltura in piccole parti e inocularle in un altro recipiente di coltura (bottiglia) per la coltura. Questo processo è chiamato subcultura o ricultura. Per la coltura monostrato, l'80% di cellule confluenti o nuove confluenti sono la fase di sottocultura ideale. La coltura cellulare in sottocoltura nella produzione di vaccini si riferisce al processo di coltura di linee cellulari stabili, eliminazione delle linee cellulari crioconservate designate per la produzione e coltura dopo la rianimazione cellulare.