Condizioni nutrizionali della coltura cellulare
Condizioni nutrizionali della coltura cellulare
1. Mezzo di coltura
Il mezzo di coltura cellulare contiene vari nutrienti necessari per la crescita cellulare, inclusi carboidrati, amminoacidi, sali inorganici, vitamine, ecc. In base alle esigenze nutrizionali delle diverse cellule, è possibile scegliere tra una varietà di mezzi sintetici, come ebss, eagle , MEM, rpmll640, DMEM, ecc.
2. Altri ingredienti aggiunti
Oltre ai nutrienti di base forniti da vari mezzi sintetici, altri componenti come siero e fattori dovrebbero essere aggiunti in base alle diverse cellule e ai diversi scopi di coltura.
Il siero fornisce sostanze importanti come la matrice extracellulare, il fattore di crescita e la transferrina e viene comunemente utilizzato il siero bovino fetale. La proporzione di siero aggiunto deve essere determinata in base alle diverse cellule e ai diversi scopi di ricerca. 10% ~ 20% di siero può mantenere la rapida crescita e proliferazione delle cellule, che è chiamata mezzo di crescita; Per mantenere la crescita lenta o l'immortalità delle cellule, è possibile aggiungere il 2% - 5% di siero, chiamato mezzo di coltura di mantenimento. Tuttavia, nel siero sono presenti anche sostanze dannose per la crescita e la riproduzione cellulare, come il complemento, le immunoglobuline e alcuni fattori inibitori della crescita; La composizione non è chiara, il che influisce sull'analisi dei risultati; L'attività sierica di diversi animali e diversi lotti è diversa, il che influisce sulla stabilità dell'effetto della coltura.
La glutammina è un'importante fonte di azoto per la crescita cellulare e svolge un ruolo importante nel processo di crescita e metabolismo cellulare. Tuttavia, la glutammina è molto instabile in soluzione e facile da degradare. Può essere decomposto di circa il 50% dopo 7 giorni a 4 ℃, quindi è necessario aggiungere la glutammina prima dell'uso.
Al fine di prevenire la contaminazione, è necessario aggiungere una certa quantità di antibiotici al mezzo di coltura.